J Hematol Oncol：揭秘缺氧前提下胶质瘤细胞中PD

2021年6月23号 讯/100医药网BIOON/ 缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)可以上调法式性灭亡配体-1 (PD-L1)在一些颅外恶性肿瘤中的表白。然而，它是否能添加PD-L1在颅内肿瘤中的表白今朝尚不分明。该研讨探讨了胶质瘤中HIF-1α和PD-L1表白的关系，并探讨其临床意义。

在临床中，PD-1/PD-L1通路的阻断可否缩短胶质瘤患者的生活期尚未获得充沛证明。跟着恶性水平的添加，缺氧作为一种次要的肿瘤微情况因子普遍存在于胶质瘤中，但缺氧对肿瘤免疫逃逸的影响尚不分明。

为了验证PD-L1与HIF-1α之间的关系，研讨职员将U251和U343胶质瘤细胞株在缺氧前提下培育分歧光阴，检测PD-L1的表白。成果显示，在缺氧(1% O2)前提下培育24、48和72小时，HIF-1α和PD-L1程度均高于对照组(21% O2)（图一）。

图一：PD-L1和HIF-1α在胶质瘤细胞系中的表白依据这些数据，再使用1%的氧气(72 h)作为进一步试验的缺氧前提。异样，可以察看到在缺氧模拟CoCl2处置下PD-L1表白也添加。

为了进一步阐发缺氧前提下HIF-1α在PD-L1上调中的作用，研讨职员起首使用siRNA敲除HIF-1α，或许使用HIF-1α克制剂(PX-478)克制HIF-1α的活性，然后检测PD-L1的表白。成果显示，缺氧前提下，HIF-1α敲除或PX-478处置均可显著下降胶质瘤细胞PD-L1的表白（图二）。鉴于HIF-1α卵白可以通过间接联合其启动子激活其靶基因，研讨职员通过ChIP-qPCR试验验证了PD-L1在胶质瘤细胞中是否是HIF-1α的间接靶点。

图二：分歧处置下HIF-1α和PD-L1 mRNA的表白

成果标明，HIF-1α间接与PD-L1启动子区(间隔转录肇端位点约0.5 kb)互相作用（图三）。此外，PD-L1和HIF-1α在胶质瘤小鼠模子中共染色显示PD-L1在肿瘤缺氧区高表白（图四）。这标明缺氧通过添加胶质瘤细胞中的HIF-1α来上调PD-L1。

图三：PD-L1启动子的染色质免疫积淀(ChIP)阐发

图四：肿瘤细胞HIF-1α和PD-L1表白的免疫荧光染色阐发

假如结合抗PD-L1和HIF-1α克制剂会触发抗肿瘤作用。将GL261细胞接种到家养型小鼠中，并用抗PD-L1抗体和/或HIF-1α克制剂处置小鼠。从肿瘤成长和存活两方面评价，结合医治比繁多医治具备更显著的抗肿瘤作用。乏味的是，原位胶质瘤模子(Luci+GL261)， PX-478也可以进步抗pd - l1抗体的颅内疗效。免疫方面成果显示，结合医治显著进步了肿瘤浸润CD4+ T、CD8+ T、CD11c+ DC的百分比，同时也下降了PD-L1的表白。此外，试验还发现细胞毒性CD8+ T细胞(IFNγ+CD8+)数目添加。综上所述，结合医治可逆转胶质瘤的免疫克制微情况。

总之，研讨成果标明PD-L1和HIF-1α在胶质瘤中呈正相关，并提供了克制HIF-1α的替代战略，作为结合免疫医治来推动胶质瘤的医治。

原始出处： Xing-Chen Ding, Liang-Liang Wang ,et al..J Hematol Oncol 12 June 2021DOI: 10.1186/s13045-021-01102-5.