起源:南京农业年夜学 2021-08-26 08:43
近日,南京农业年夜学农学院智海剑传授团队在国内动物畛域有名杂志Molecular Plant上在线颁发了“A cell wall-localized NLR confers resistance to Soybean mosaic virusby recognizing viral-encoded cylindrical inclusi
近日,南京农业年夜学农学院智海剑传授团队在国内动物畛域有名杂志Molecular Plant上在线颁发了“A cell wall-localized NLR confers resistance to Soybean mosaic virusby recognizing viral-encoded cylindrical inclusion protein”。该论文从年夜豆种类年夜白麻中图位克隆了一个编码NLR(Nucleotide binding, leucine-rich repeat receptor)卵白的抗年夜豆花叶病毒(Soybean Mosaic Virus, SMV)基因Rsc4-3。与以往发现的细胞外行使抗病功效的NLR卵白分歧,该抗病NLR卵白Rsc4-3在动物细胞壁上与年夜豆花叶病毒无毒因子CI特异辨认并介导对SMV的抗性。
年夜豆是我国紧张的食粮和油料兼用作物,来源于我国,并已有几千年的莳植汗青。SMV是重大危害年夜豆临盆的全国性病害,克隆抗SMV基因并说明其抗性机制对SMV防控尤为紧张。
为得到抗SMV基因,该团队后期发现抗病种类年夜白麻14号染色体上有一个显性抗SMV位点,并实现精密定位。本论文在此根底上,通过瞬时表白和Crispr/Cas9介导的基因敲除等办法证实了精密定位区间内只有Rsc4-3介导年夜白麻对SC4、SC7等多个SMV株系的抗性,但不克不及介导对SC15株系的抗性(图1)。Rsc4-3编码CC-NB-LRR构造的NLR类抗病卵白,通过叶片酶解、质壁拆散等亚细胞定位试验发现该卵白只存在于细胞壁上,这与已往报道的NLR卵白胞内定位成果的显明分歧,研讨还发现Rsc4-3的N端存在能够的棕榈酰化位点且该位点对立病反馈至关紧张。
该研讨通过分歧株系的SMV基因组片断重组试验和单病毒基因诱发Rsc4-3介导的免疫反馈试验,发现Rsc4-3辨认的无毒基因是SMV编码的CI卵白(图2);尽管CI卵白在细胞表里都有散布,但Rsc4-3只在胞外通过间接互作辨认散布在胞外的CI卵白引发抗病反馈。通过进一步氨基酸点渐变,发现了CI第572个氨基酸的变异决议SMV的毒性,CI的572位酪氨酸(Y)渐变为组氨酸(H)或谷氨酰胺(Q)会招致Rsc4-3的抗性丢失。SC15株系的毒性CI可以克制SC4株系的无毒CI所诱发的Rsc4-3介导的抗病反馈,田间无毒和有毒株系混合侵染时,有毒株系表示上位性,这也给年夜豆抗SMV育种带来挑战。该研讨提醒了年夜豆与年夜豆花叶病毒攻防机制(图3),为年夜豆SMV防控奠基了根底。(100yiyao.com)
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